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药物发明

单B细胞抗体制备

尊龙凯时提供单B细胞抗体制备手艺服务，包括单B细胞分选和单B细胞Ig基因转录,扩增,测序等。单B细胞抗体制备手艺是现在新型、高效的抗体发明要领之一，具有速率快、通量高、以及抗体重轻链可变区自然配对的优势。
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  • 单克隆抗体(mAb)是许多诊断应用和研究的主要工具。别的，单克隆抗体已成为许多疾病的理想治疗用品，在癌症、自身免疫性疾病和熏染性疾病的治疗中获得了很好的应用。为了研究和治疗目的，已有许多手艺用于天生单克隆抗体。单B细胞抗体制备手艺是近些年新生长的一种制备单抗的手艺。该要领具有速率快、通量高、以及抗体重轻链可变区自然配对的优势，是现在新型、高效的抗体发明要领之一。

    单B细胞抗体制备平台.jpg

    单B细胞抗体制备的原理是每个B细胞只含有一对功效性的重链和轻链，每个B细胞具有只爆发一种特异性抗体的特征，以是可以直接从单个B细胞中扩增出抗体基因获得单抗。

  • 单B细胞抗体制备流程

    单B细胞抗体制备流程.png

  • 单B细胞分选

    凭证研究应用，可以随机或抗原选择性地从外周血或淋巴组织(如骨髓、脾脏)中疏散单B细胞。关于B细胞疏散，现在单B细胞分选方法有流式细胞分选法、 磁珠细胞分选法、 显微操作法、 激鲜明微切割法以及微流控分选法。 其中流式细胞荧光分选手艺 (Fluorescence activated Cell Sorting，FACS)是现在一种成熟、 有用的单细胞分选要领。

    FACS.png

  • 单B细胞Ig基因转录,扩增,测序

    从单个B细胞中构建互补DNA (cDNA)为同时剖析表达的IgH和IgL链基因提供了一种准确的要领。通常，单B细胞cDNA合成是在用于细胞沉积和细胞裂解的装备中举行的(例如96孔板、纳米孔芯片等)，这确保了利便处置惩罚大宗样品并将交织污染的危害降至最低。全长Ig可变区基因转录物通过巢氏PCR举行扩增，其中RT-PCR产品可作为第一轮PCR的样品举行进一步反应。

    无论使用何种Ig可变区基因扩增战略，编码抗体特异性的单B细胞Ig可变区基因转录信息随后通过测序获得。然后使用种种数据库，如NCBI的IgBLAST、IMGT，可以很容易地识别和剖析重排的V、D和J基因片断是否保存突变、插入和缺失。

  • 案例剖析: Nectin-4 Mouse Serum Titer

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  • 案例剖析: Nectin-4 (4-1) Sorting Single B Cell

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  • 案例剖析: Nectin-4 (4-1) Sequencing (Top20)

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  • 案例剖析: Nectin-4 (4-6) Sorting Single B Cell

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  • 案例剖析: Nectin-4 (4-6) Sequencing (Top20)

    Nectin-4-(4-6)-Sequencing-(Top20).png

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